離子對試劑及鹽類的使用和注意事項(xiàng)說明
點(diǎn)擊次數(shù):2351次 更新時(shí)間:2022-03-25
離子對試劑及鹽類是一類常用的實(shí)驗(yàn)室試劑,將這類試劑加入到反相色譜流動相中可以增強(qiáng)離子樣品的保留。使用其可以改善疏水鍵合相表面的離子交換能力,可以在溫和的流動相pH條件下更好地控制酸性或堿性樣品的保留。
通過試劑上的疏水部分(常見的有庚烷基,十二烷基)與色譜柱固定相發(fā)生作用而吸附在柱床上,使固定相具有了一定的離子交換能力,從而增強(qiáng)對帶相反電荷的分析物的保留。
離子對試劑及鹽類的使用:
加入離子對的目的
加入與待測組分相反的離子,形成弱極性離子對,增強(qiáng)保留,改善峰形。
加入離子對的情形
反相HPLC中不保留或保留很差;
化合物有強(qiáng)離子官能團(tuán):磺酸基、羧基、氨基、銨基等。
注意:化合物在反相流動相體系中要有足夠的溶解度,能不用就不使用。使用的色譜柱專柱專用,不同離子對可以使用同一色譜柱。
離子對試劑及鹽類的注意事項(xiàng):
●試劑的用量:按當(dāng)量計(jì)算,濃度至少比樣品濃度大4~5倍;
●磺酸類離子對不建議采用梯度洗脫;超過30%的有機(jī)相建議預(yù)混;
●有機(jī)相優(yōu)先使用甲醇;建議使用進(jìn)口試劑,特別是波長小于240nm時(shí);使用容易出現(xiàn)鬼峰;
●溫度變化對離子對色譜的影響更大;
●離子對色譜中,pH對物質(zhì)保留的影響正好與普通反相色譜相反;
●經(jīng)驗(yàn)性:加入烷基磺酸鈉,堿性物質(zhì)保留時(shí)間增加;中性和酸性物質(zhì)保留時(shí)間減小。
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